Přímá sada RT-qPCR
Popis sady:
◮ Přímá souprava RT-qPCR využívající reverzní transkriptázu Foreasy a DNA polymerázu Foreasy HS Taq vyvinutá společností Foregene s jedinečným reakčním pufrem činí tuto soupravu se silnou odolností a kompatibilitou a může přímo testovat reakci pomocí systému Foregene Lysis jako templátu.Tato sada se může použít pro sadu pro detekci nukleových kyselin COVID-19 a vývoj sady pro detekci nukleových kyselin pro jiné patogenní bakterie.
Popis
Direct RT-qPCR Kit poskytuje samostatně balený RT-qPCR pufr a vysoce účinný enzymsměs (Taq、M-MLV、RI), díky čemuž je vhodná pro vytváření back-end kitů a systémuseřízení, v rámci jednoduchého ověření.
Specifikace
500 T, 50 000 T
Součásti stavebnice
| Obsah sady (20 μL reakčního systému) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50 000 T | |
| Přímá enzymová směs | 500 μl×1 | 50 ml×1 |
| 2× přímá vyrovnávací paměť RT-qPCR | 1 ml×5 | 500 ml×1 |
| Návod | 1 | 1 |
Provozní kroky
Před přípravou činidel by měla být všechna činidla v soupravě rozmražena při pokojové teplotě a jemně promíchána.
A: Připravit of šablona a činidlo
1. Připravte připravený templát RNA (K extrakci a purifikaci templátu RNA se doporučuje použít sadu Foregene Total RNA Isolation Kit) nebo produkt pro krakování vzorků (doporučuje se použít systém Foregene Lysis), specifické primery (10 μM) a další relevantní spotřební materiál, přístroj.
2. Vložte 2× přímý RT-qPCR pufr, ddH2O bez RNázy a 20× referenční barvivo ROX (pokud'je potřeba) v krabici s ledem, aby se přirozeně roztavily a jemně promíchaly.
B: Připravit of RT-qPCR Systém
Stůl 1 : Připravit of RT-qPCR system
| Komponent | Hlasitost | Závěrečné soustředění |
| 2× přímá vyrovnávací paměť RT-qPCR | 10 μL | 1× |
| Přímá enzymová směs | 1μL | |
| Forward Primer (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Reverzní primer (10 μM) | 0,8 μl | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Šablona (RNA nebo lyzát) | X μL | |
| 20× referenční barvivo ROX | - | 1* |
| RNase-FreeddH20 | (6,4-X) μl | |
| Celkový objem | 20μL |
C: Soubor a RT-qPCR reakce program
Stůl 2 : RT-qPCR reagovaton program nastavení (pro příklad: dva-krok metoda)
| Krok | Teplota | Čas | Cykly | Obsah | |
| 1 | 50℃ | 15 min | 1* | 1 | Reverzní transkripce |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Předdenaturace | |
| 3 | 95℃ | 10 sec | 40-45 | Denaturace | |
| 60℃ | 30 sekund 2* | Žíhání/prodlužování | |||
Skladování a trvanlivost
-Souprava by měla být skladována při -20± 5℃.Doba platnosti je 12 měsíců.
-Vyhněte se opakovaným cyklům zmrazování a rozmrazování (<5 cyklů).
