Sada ForeDirect RT-qPCR
Popis sady:
◮Pro přímou amplifikaci RNA ze sbírek výtěrů bez procesů čištění RNA.Tato sada dokončí cykly qRT-PCR během jedné hodiny.Enzymová směs je optimalizovaná směs reverzní transkriptázy, Hot-Start Taq DNA polymerázy, inhibitoru RNázy.Reakční pufr obsahuje všechny požadované složky, včetně optimalizovaných složek pufru, Mg2+dUTP a dNTP.
Popis
ForeDirect RT-qPCR Kit je navržen pro přímou amplifikaci RNA v reálném čase ze sbírek výtěrů bez procesů čištění RNA.Tato sada dokončí cykly qRT-PCR během jedné hodiny.Enzymová směs je optimalizovaná směs reverzní transkriptázy, Hot-Start Taq DNA polymerázy, inhibitoru RNázy.Reakční pufr obsahuje všechny požadované složky, včetně optimalizovaných složek pufru, Mg2+dUTP a dNTP.
Specifikace
100T
Součásti stavebnice
| Činidlo uvolňující nukleové kyseliny |
| RNA chránič |
| 2× RT-qPCR Buffer |
| Směs enzymů (Taq&M-MLV) |
| Instrukce |
Aplikace PCR
1. Jakmile byly zkumavky PCR krátce odstředěny, umístěte je do nádoby na vzorky amplifikačního přístroje.
2. Tepelný protokol
| Krok | Teplota | Čas | Cykly | |
| 1 | Reverzní transkripce | 50℃ | 15 minut | 1 |
| 2 | Předdenaturace | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturace | 95℃ | 10 sekund | 42 |
| 4 | Žíhání/prodlužování | 60℃ | 30 sekund | |
Poznámka:Fluorescenční signál byl detekován ihned po kroku prodloužení každého cyklu.
3. Po nastavení uložte soubor a spusťte reakční program.
Provozní kroky
Před přípravou činidel by měla být všechna činidla v soupravě rozmražena při pokojové teplotě a jemně promíchána.
Příprava činidla
1. Připravte směs pro uvolňování nukleové kyseliny
| Komponent | Hlasitost na vzorek nebo ovládání |
| Činidlo uvolňující nukleové kyseliny | 5 μl |
| RNA chránič | 0,5 μl |
2. Připravte reakční směs
| Komponent | Hlasitost na vzorek nebo ovládání |
| 2× RT-qPCR Buffer | 15 μl |
| Směs enzymů (Taq&M-MLV) | 1,5 μl |
| Primery a sondy | 1μL |
Skladování a trvanlivost
-Souprava by měla být skladována při -20± 5℃.Doba platnosti je 12 měsíců.
-Vyhněte se opakovaným cyklům zmrazování a rozmrazování (<5 cyklů).
