Lnc-RT Heroᵀᴹ I (s gDNázou) (Super Premix pro syntézu prvního vlákna cDNA z lncRNA)
Specifikace
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (s gDNázou) je systém reverzní transkripce speciálně vyvinutý pro lncRNA k rychlému odstranění kontaminace genomové DNA.5×gDNase Mix dokáže rychle odstranit zbývající genom v RNA při 42 °C po dobu 2 minut, čímž se účinně zabrání interferenci genomu s výsledky qPCR.
5×L-RT HeroTM Mix obsahuje Foregene LncRNA reverzní transkriptázu speciálně vyvinutou společností Foregene, což je nový typ reverzní transkriptázy speciálně pro lncRNA a další dlouhé RNA komplexní templáty, se silnější afinitou RNA a vyšší účinností reverzního záznamu.Optimalizovaný systém zrychluje rychlost reverzní transkripce a může snadno přepisovat RNA templáty s vysokým obsahem GC a složitou sekundární strukturou.Syntéza prvního vlákna cDNA může být dokončena při 42 °C za 15 minut.
Součásti stavebnice
| 5× Směs gDNázy |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| DdH2O bez RNázy |
| Instrukce |
Vlastnosti a výhody
■Efektivní schopnost odstranit gDNA, která dokáže odstranit gDNA v šabloně do 2 minut.
■ Dokáže účinně zvrátit transkripci lncRNA.Když je produkt reverzní transkripce podroben qPCR, je hodnota Ct nižší než u konvenčního systému reverzní transkripce.
■ Efektivní systém reverzní transkripce, dokončení syntézy prvního vlákna cDNA trvá pouze 15 minut.
■ Komplexní šablony: šablony s vysokým obsahem GC a složitou sekundární strukturou lze také s vysokou účinností obrátit.
■ Vysoce citlivý systém reverzní transkripce, šablony na úrovni pg mohou také získat vysoce kvalitní cDNA.
■ Systém reverzní transkripce má vysokou tepelnou stabilitu, optimální reakční teplota je 42℃a stále má dobrou reverzní transkripci při 50℃.
Aplikace sady
lncRNA relativní kvantitativní analýza.
lncRNA absolutní kvantitativní analýza.
Dokáže rychle a přesně analyzovat stopovou RNA, jako je RNA virus.
Reverzní transkripce templátů RNA s vysokým obsahem GC nebo složitou sekundární strukturou.
Pracovní postup
Skladování a trvanlivost
Sada by měla být skladována při -20°C. Produkt skladujte v chladničce s konstantní teplotou při -20 °C°C ihned po obdržení.Pokud jsou skladovací podmínky vhodné, produkt během doby platnosti 1 roku nesníží žádné vlastnosti.
Průvodce analýzou problémů
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specifické zesílení
1. Nerozumný návrh základního nátěru
Doporučení: Navrhujte základní nátěry podle zásad návrhu základního nátěru.
2. Genomové zbytky.
Návrh: Ujistěte se, že teplota reakce odstranění gDNA v prvním kroku je 42 °C a reakční doba může být také prodloužena na 5 minut.
Žádný zesilovací signál pomocí RT-qPCR
1. RNA je degradována.
Doporučení: Materiál pro extrakci RNA by měl být co nejčerstvější a měla by být použita vysoce kvalitní a vysoce čistá RNA.
2. RNA obsahuje inhibitory.
Doporučení: Mezi inhibitory reverzní transkripce obecně patří SDS, guanidinové soli, EDTA atd. Doporučuje se promýt sraženinu RNA 70% ethanolem, aby se inhibitory odstranily.
3. Problémy návrhu základního nátěru.
Doporučení: Podle principu návrhu primeru přepracujte primery pro kontrolu.
Cílový pás se objeví v prázdném ovládacím prvku
1. Kontaminace pracovních nástrojů nebo činidel.
Doporučení: Všechna činidla nebo zařízení pro experiment by měla být autoklávována.Při manipulaci buďte opatrní a šetrní, aby nedošlo k nasátí vzorků DNA do pipety nebo vylití z centrifugační zkumavky.
2. Ke kontaminaci došlo během přípravy reakčního systému PCR.
Doporučení: Při manipulaci učiňte nezbytná opatření, jako např.: noste latexové rukavice, použijte filtrační špičky.Použijte Real Time PCR Mix v systému odolném proti kontaminaci.
3. Základní nátěry jsou degradovány.
Návrh: Použijte elektroforézu SDS-PAGE k detekci, zda jsou primery degradovány, a nahraďte je novými primery pro experimenty fluorescenční detekce.
Návod k použití:
Lnc-RT HeroTM I (s gDNázou) (Super Premix pro syntézu prvního řetězce cDNA z lncRNA) Návod k použití
