Metody PCR a kontaminace aerosolem nukleových kyselin v laboratořích pro testování nukleových kyselin jsou jako dvě strany jedné mince.Můžeme si jen vybrat, jestli to budeme mít nebo ne, ale nemůžeme si vybrat, jestli to chceme, nebo je utratit.

1. Screening odstraňovače DNA

Aby bylo dosaženo prostorového odstranění kontaminace aerosolem nukleových kyselin, je nejprve nutné odfiltrovat odstraňovače DNA, které dokážou odstranit nukleové kyseliny v kapalném stavu.Protože odstraňovačů DNA, které skutečně fungují, není mnoho.Pro experimentální metodu viz: Odstraňovač DNA nemůže být "tajným koutkem" laboratoře!

V tomto experimentu bylo 100 kopií/μl (CT přibližně 31) plazmidu ASFV a odstraňovače DNA kvantifikovaných digitální PCR smícháno ve stejných objemech a poté reagovalo při pokojové teplotě po dobu 10 minut, 20 minut a 30 minut, v daném pořadí.Po extrakci nukleové kyseliny byla provedena qPCR amplifikace.Byla porovnána pozitivní kontrola smíchaná s plazmidem a vodou.Vzhledem k tomu, že experiment nebyl dokončen současně, může být mezi výsledky určitá odchylka, která však neovlivňuje závěr experimentu.Doposud jsem hodnotil 10 komerčních produktů na odstraňování DNA.Pouze produkty č. 1, č. 6 a č. 8 mohou účinně degradovat plazmidovou DNA v kapalném stavu.Jiné produkty nemají téměř žádný účinek.

Tabulka 1 Účinek odstranění nukleové kyseliny komerčně dostupného odstraňovače DNA

2. Experiment s efektem odstranění DNA u běžně používaných dezinfekčních prostředků

1. Screening běžně používaných dezinfekčních prostředků

V laboratořích se běžně používá mnoho druhů dezinfekčních prostředků: aldehydy, fenoly, alkoholy, kvartérní amoniové soli, peroxidy, chlorové přípravky a kyseliny a zásady.Dezinfekční účinky těchto dezinfekčních prostředků na mikroorganismy byly plně ověřeny experimenty, ale neexistují dostatečné experimentální údaje o degradačním účinku nukleových kyselin.Laboratoře pro testování nukleových kyselin potřebují dezinfekční prostředek, který má nejen dobrý dezinfekční účinek na mikroorganismy, ale také dokáže degradovat DNA.Výsledky testu ukazují, že pouze dva chlorové přípravky 84 dezinfekční prostředek a kyselina trichlorisokyanurová a 1 M kyselina chlorovodíková splňují požadavky.Vzhledem k tomu, že 1M kyselina chlorovodíková je vysoce korozivní, doporučuje se používat chlorové přípravky jako likvidaci odpadu v laboratořích pro testování nukleových kyselin.Chlorové přípravky jsou však korozivní pro kovy a nelze je použít k dezinfekci nástrojů a zařízení.

Tabulka 2 Účinky různých typů dezinfekčních prostředků na odstranění DNA

2. Minimální účinná koncentrace chlorových přípravků

Dezinfekční prostředky na bázi chlóru mají silný účinek na degradaci DNA, ale vzhledem ke své korozivnosti a podráždění kovů je lze použít k čištění podlahy, nekovových pracovních desek, namáčecích špiček, odstředivek a dalších testovaných předmětů.

Podle "Nových technických pokynů pro dezinfekci koronární pneumonie": Znečišťující látky (krev pacientů, sekrety a zvratky) dostupný chlor 5g/L-10g/L dezinfekční prostředek obsahující chlor;podlahy, stěny a povrchy předmětů používejte dostupný chlór 1 g/l Chlorový dezinfekční prostředek: oděvy, lůžkoviny a další textilie se nejprve na 30 minut namočí do chlórového dezinfekčního prostředku s 0,5 g/l dostupného chlóru a poté se vyčistí jako obvykle.

Tabulka 3 Účinek odstraňování DNA různých koncentrací chlorového dezinfekčního prostředku

Výsledky testu ukazují, že: když je účinná koncentrace chloru vyšší nebo rovna 1,2 g/l, dezinfekční prostředek obsahující chlor může zcela degradovat 100 kopií/μl plazmidu, když je používán po dobu 5 minut.Při působení po dobu 10 minut může dezinfekční prostředek 84 s účinnou koncentrací chloru vyšší nebo rovnou 0,6 g/l zcela degradovat 100 kopií/μl plazmidů.

3. Experiment odstranění vzduchu znečištěného aerosolem nukleové kyseliny

Jak vyčistit vzduch znečištěný aerosoly nukleových kyselin?Většina myšlenek směřuje k vytvoření prostředí kontaminovaného aerosolem a jeho následnému vyčištění, případně k vyčištění nukleových kyselin po kontaminaci.Experiment, který nelze opakovat a výsledky pokusu nelze kvantitativně analyzovat, je pro mě nesmyslný, proto jsem si vypůjčil některé metody dezinfekční dezinfekce vzduchu.Viz "GB27948-2020 Všeobecné požadavky na vzduchové dezinfekční prostředky" a "Technické specifikace dezinfekce"

1. Testovací materiály

1.1 Odstraňovač DNA: V tomto experimentu byly vybrány dva komerčně dostupné odstraňovače DNA 6 a 8 v tabulce 1.

1.2 Testovací plazmid: Vzhledem k tomu, že hodnota CT většiny laboratorních znečištění bude vyšší než 30, je koncentrace genového plazmidu ASFV tentokrát asi 100 kopií/μl a fluorescenční kvantitativní PCR CT je asi 31,07.Přidejte plazmid do vločkového vatového tamponu a vysušte na vzduchu.

1.3 Testovací přístroj: Dezinfekční přístroj Bilingkehan KVBOX, který je laskavě podporován společností Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., má vynikající účinnost při dezinfekci vzduchu pomocí dezinfekčního prostředku na bázi peroxidu vodíku a může účinně zabíjet spóry a jiné mikroorganismy.

1.4 Testovací prostor: uzavřené přenosové okno o objemu asi 0,1 metru krychlového.

2. Testovací metoda

Množství dezinfekčního prostředku nastaveného na dezinfekčním stroji je 10 ml a koncentrace je 100 ml/m3, což je mnohem více než „GB27948-2020 Obecné požadavky na dezinfekci vzduchu“: při použití dezinfekce aerosolovým sprejem by množství dezinfekčního prostředku mělo být ≤10 ml/m3