Enzym Hot-start Taq je široce používán.Ve srovnání s běžnou DNA polymerázou může enzym Taq s horkým startem účinně zabránit určité nespecifické amplifikaci a tvorbě primerových dimerů a může účinně zlepšit úspěšnost amplifikace cílového genu.Zejména v oblasti genetického testování byl enzym Taq s horkým startem identifikován jako povinný standard v průmyslu a běžná DNA polymeráza by se neměla používat.Jak je vidět z výše uvedeného, ​​enzymy Taq s horkým startem jsou široce používány.V současné době je na tuzemském trhu mnoho značek hot-start Taq enzymů, ale není mnoho hot-start Taq enzymů s vysokou kvalitou.Tváří v tvář tolika hot-start produktům s enzymy Taq, jak bychom si měli vybrat?

1. Vyberte enzym Taq s horkým startem s vysokou účinností amplifikace

Účinnost amplifikace PCR úzce souvisí s výkonem enzymu Taq.Po optimalizaci dobrého systému enzymové reakce Taq je účinnost amplifikace vyšší než 95 % a rozsah amplifikace počátečního množství templátu je široký.Uspokojivé amplifikace lze dosáhnout, když je obsah cílového genu nízký, a není snadné se otrávit, když je množství templátu vysoké a doba exponenciální amplifikace je dlouhá.U enzymu Taq se špatným výkonem, i když byl reakční systém mnohokrát optimalizován, je účinnost amplifikace stále menší než 90 %, tvar „S“ amplifikační křivky není zřejmý, sklon je malý a křivka je plochá.Když je množství templátu nízké, nelze ho zesílit, a když je množství templátu vysoké, efekt amplifikace není ideální.Proto je výběr DNA polymeráz s vysokou účinností amplifikace rozhodující pro úspěch PCR a qPCR.

2. Zvolte hot-start Taq enzym se silnou enzymatickou silou

Enzymatická síla enzymu Taq souvisí s účinností amplifikace.Obecně platí, že čím silnější je enzymatická síla enzymu Taq s horkým startem, tím delší je exponenciální růstová perioda PCR amplifikace, typičtější křivka ve tvaru písmene S, vyšší hodnota fluorescenčního signálu a tím vhodnější pro detekci multiplexní PCR.Značkové DNA polymerázy se slabou enzymatickou silou mohou obecně podporovat pouze 2-plexní reakce.Při provádění 3-plexních reakcí je amplifikační křivka nízká, hodnota fluorescenčního signálu nízká a neexistuje žádná typická amplifikační křivka, takže je obtížné posoudit výsledky.

3. Vyberte enzym Taq pro horký start s vysokou citlivostí

Obecně řečeno, DNA polymeráza má vysokou účinnost amplifikace a vysokou citlivost, ale existují také nekonzistence.Pokud je abundance cílového genu ve vzorku, který má být amplifikován, nízká, doporučuje se otestovat amplifikační citlivost enzymu Taq.Nejběžnější metodou detekce je provedení 10násobného nebo 5násobného gradientového ředění fragmentu cílového genového plazmidu, provedení PCR detekce při nižším ředění a výběr enzymu Taq s horkým startem s vyšší citlivostí detekce.

Z výše uvedeného je vidět, že výzkumníci si musí vybírat podle vlastních experimentálních požadavků a podmínek financování.Nejlepší je provést amplifikační experiment s gradientovým ředěním, aby se zjistila účinnost a citlivost amplifikace enzymu Taq s horkým startem.

Příklad Foregene's Taq DNA polymeráza:

Foreasy HS Taq DNA polymeráza

Popis

Foreasy HS Taq DNA Polymerase je DNA polymeráza exprimovaná v inženýrských bakteriích Escherichia coli technologií genové rekombinace.Enzym je kombinován s unikátním reakčním pufrem, díky kterému je produkt vysoce odolný a kompatibilní a může přímo použít lyzát vzorku (systém Foregene Lysis) jako templát pro detekční reakce.

aplikace

Kvalitativní PCR a kvantitativní PCR detekce purifikovaných templátů a nepurifikovaných templátů.

Kontrola kvality

1. Nebyla zjištěna žádná exogenní nukleázová aktivita

2.PCR metoda k detekci reziduální genomové DNA bez hostitele

3. Dokáže účinně amplifikovat jednokopiové geny v lidském genomu

4. Skladujte při pokojové teplotě po dobu jednoho týdne, bez zjevných změn aktivity

Podrobnosti o produktu: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/