Úvod:

Molekuly RNA mohou značně interagovat s jinými biologickými molekulami, jako jsou proteiny, DNA a RNA, a proto existují v buňkách a organismech ve formě makromolekulárních komplexů.Mezi nimi RNA-proteinové komplexy jsou existence a funkce RNA Jednou z důležitých forem.RNA pull-down je klasická metoda pro screening a identifikaci molekul RNA, zejména interagujících proteinů molekul lncRNA, a je uznávána většinou výzkumníků a mezinárodních autoritativních akademických časopisů.FORREGENE se s vámi dnes podělí o experimentální princip a technický postup stahování RNA, možná to využijete

1. Experimentální princip technologie stahování RNA:

In vitro transkripce a syntéza biotinem značené cílové lncRNA nebo fragmentů lncRNA (včetně fragmentů RNA používaných jako pozitivní a negativní kontroly) a inkubujte s buněčnými extrakty;použijte magnetické kuličky ukotvené avidinem ke sběru komplexů RNA-protein nebo RNA-RNA. Po důkladném promytí je komplex eluován.Pokud detekujete proteinovou cílovou molekulu, která interaguje s lncRNA, proveďte elektroforézu proteinu na produktu RNA-pull down, detekujte cílový protein barvením stříbrem a nařežte gel pro hmotnostní spektrometrii;také přímo provést ověření western blot na stahovacím produktu;pokud je detekován U cílových molekul RNA, které interagují s lncRNA, jsou produkty RNA-pull down podrobeny extrakci RNA a je provedena specifická detekce qRT-PCR.

2. Proces experimentu technologie stahování RNA:

3. Technický servis pro stahování RNA FOREGENE:

Buněčná kultura

Příprava extraktu celkových/nukleárních/plazmatických proteinů buněk

RNA pull down experiment

SDS-PAGE elektroforéza, stříbrná skvrna

Hmotnostní spektrometrie a WB experimenty

Experimentální zpráva

4. Experimentální případ

Následující obrázek ukazuje výsledky FJ Bio-Bio's RNA pull-down a detekce elektroforézou SDS-PAGE, kde červená šipka označuje rozdílový pás:

Výzkumná skupina profesora Song Xu ze Sichuan University nashromáždila 15 let dlouhodobé akumulace v oblasti výzkumu lncRNA.Foregene Bio a výzkumná skupina profesora Song Xu spolupracovala na spuštění technologie stahování RNA lncRNA, která vám poskytne uspokojivý výsledek pro váš experiment.