• Facebook
  • linkedin
  • Youtube

Zrození PCR

PCR (polymerázová řetězová reakce)

Od vynálezu polymerázové řetězové reakce uplynulo více než 30 let.Za více než 30 let, poté, co řada vědců z celého světa pokračuje v doplňování a zdokonalování, se technologie PCR stala nejrozšířenější a nejčastěji používanou a nejdůležitější metodou základního výzkumu v celé oblasti věd o živé přírodě.

TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR atd. vyvinuté na základě široké aplikace tradiční technologie PCR, stejně jako nově vzniklá Digital PCR (digitální PCR), výrazně obohatily výzkumné metody většiny vědeckých výzkumníků a výrazně urychlily vývojový proces moderních věd o živé přírodě, zejména molekulární biologie, významně přispěly ke studiu života a přírody lidstva jako celku.

PCR-princip
Polymerase-Chain-Reaction-PCR

Vady tradiční technologie PCR

Komplexní separace nukleových kyselin aextrakce:

★ Tradiční technologie PCR: nutná

★ Technologie odvozená z PCR: vyžaduje se

★ Vzorky DNA a RNA: velké rozdíly, náročné provozní požadavky

★ Nebezpečí pro tělo: toxická činidla poškozují tělo

640

Tradiční technologie PCR a technologie derivátů mají předpoklady – separaci a čištění nukleových kyselin

Jakýkoli biologický vzorek musí projít řadou komplikovaných a únavných zpracování vzorků, aby se získaly vzorky nukleové kyseliny, které splňují požadavky technologie PCR.

Separace a extrakce DNA a RNA byla vždy základním úkolem, který příslušní vědečtí výzkumníci potřebují každý den opakovat.

Vzhledem k obrovským rozdílům mezi vzorky jsou separační a extrakční procesy DNA a RNA také velmi odlišné.Tato práce vyžaduje vysokou úroveň technické zdatnosti operátorů.Tradiční separační a extrakční techniky vyžadují dlouhodobý kontakt s některými vysoce toxickými chemickými činidly.Způsobí nevratné poškození těla operátora a dokonce způsobí přímé poškození během experimentu.

p5

Pro ty, kteří mají velké množství vzorků ke studiu, je separace a extrakce nukleových kyselin zároveň pracně náročným úkolem.

Soupravy pro izolaci a extrakci nukleových kyselin na trhu jsou nyní vyspělé a existuje mnoho značek, ale jsou zhruba stejné.Ať už se jedná o odstředivou soupravu na koloně s membránou silikagelu nebo soupravu pro metodu magnetických kuliček, zabere to spoustu času a je to nákladné.Kromě ceny soupravy existují také speciální požadavky na laboratorní vybavení.Automatizované pracoviště používané v metodě magnetických kuliček je velmi typické velkorozměrové zařízení vysoké hodnoty, které je pro laboratoř obrovským nákladem.

p7

celkem

Před prováděním PCR experimentů je předúprava vzorků pro výzkumníky nevyhnutelná a vždy bolest hlavy.Jak tento problém vyřešit a zda lze provádět PCR experimenty bez separace a extrakce nukleových kyselin, vždy přemýšlela většina vědeckých výzkumníků a pracovníků klinických laboratoří.

Foregenovo řešení

Po letech pečlivého výzkumu technologie Direct PCR a souvisejících sad Forgene úspěšně prolomil mnoho úzkých míst a úspěšně dosáhl přímé PCR pro mnoho typů různých vzorků se silnou odolností a adaptabilitou, což výzkumníkům umožnilo zbavit se těžkopádné a nebezpečné separace a extrakce nukleových kyselin.Tím se výrazně sníží pracnost každého, urychlí se proces experimentu a ušetří se náklady na vědecký výzkum a testování.

Forgeneovo porozumění a znalost DirectPCR

Za prvé, technologie DirectPCR je přímá technologie PCR pro různé biologické vzorky tkání.Za tohoto technického stavu není potřeba separovat a extrahovat nukleové kyseliny a vzorek tkáně je přímo použit jako objekt a jsou přidány primery cílového genu pro PCR reakci.

Za druhé, technologie DirectPCR není pouze tradiční technologií amplifikace templátu DNA, ale zahrnuje také reverzní transkripční PCR templátu RNA.

Za třetí, technologie DirectPCR nejen přímo provádí rutinní kvalitativní PCR reakce na tkáňových vzorcích, ale zahrnuje také reakce qPCR v reálném čase, což vyžaduje, aby reakční systém měl silnou schopnost odolávat interferenci fluorescence na pozadí a antagonizovat endogenní zhášeče fluorescence.

Za čtvrté, vzorky tkáně cílené technologií DirectPCR vyžadují pouze uvolnění templátů nukleové kyseliny a neodstraňují proteiny, polysacharidy, ionty solí atd., které interferují s reakcí PCR.To vyžaduje, aby polymeráza nukleové kyseliny a PCR Mix v reakčním systému měly vynikající antireverzibilitu a adaptabilitu a mohly zajistit enzymatickou aktivitu a přesnost replikace za složitých podmínek.

Za páté, tkáňové vzorky cílené technologií DirectPCR nebyly podrobeny žádnému ošetření obohacením nukleové kyseliny a množství templátu je velmi malé, což vyžaduje extrémně vysokou citlivost a účinnost amplifikace reakčního systému.

Závěr

Technologie DirectPCR je jedním z nejdůležitějších technologických vývojů a inovací za posledních 30 let od zrodu technologie PCR.Forgene je a bude průkopníkem a inovátorem této technologie.

Aplikační vyhlídky technologie DirectPCR jsou velmi široké.Neustálé zlepšování a propagace této technologie jistě přinese podvratné změny do vědeckého výzkumu a inspekční práce.Jedná se o revoluci technologie PCR.


Čas odeslání: 21. února 2017