Úvod:

RNA, vědecký název ribonukleová kyselina, její zkratka pochází z RiboNucleic Acid, je druh nukleové kyseliny vzniklý spojením nejméně desítek ribonukleotidů prostřednictvím fosfodiesterových vazeb.

Předpokladem zkoumání RNA je extrahovat celkovou RNA bez znečištění a základní princip extrakce RNA lze zhruba shrnout takto:

1. Nejprve narušte buňky

2. Poté odstraňte makromolekulární nečistoty (proteiny, lipidy, DNA atd.)

3. Nakonec se RNA vysráží, přičemž se odstraní soli a organická rozpouštědla a RNA se dále čistí

Minulost a současnost extrakční metody

První generací metody extrakce RNA je precipitační metoda TRIzol (používaná činidla zahrnují guanidinisothiokyanát, fenol, chloroform atd.), kterou vynalezli dědeček Piotr Chomczynski a babička Nicoletta Sacchi, protože tento vynález umožňuje rychlou a snadnou extrakci RNA, od té doby odstartoval vzestup výzkumu RNA.

Později děda prodal tento patent společnosti Invitrogen a Invitrogen tuto metodu propagoval do světa a stal se široce používanou metodou.

Později společnost Invitrogen získala společnost Thermo!

Reprezentativní produkt: Invitrogen's TRIzol reagent

Precipitační metoda TRIzol však vyžaduje vícenásobnou precipitaci a extrakci RNA a použitá činidla jsou toxická a jejich provoz trvá dlouhou dobu.

Proto vznikla druhá generace kolonově-enzymové purifikace, využívající silikagelovou membránu jako specifický adsorpční materiál nukleových kyselin pro maximalizaci výtěžku RNA ve vzorku při současném odstranění dalších nečistot.

Metoda druhé generace zjednodušuje provoz na základě stabilního výkonu, snižuje rizikový faktor a zlepšuje efektivitu extrakce RNA.

Reprezentativní produkty: QIAGEN RNeasy a většina domácích produktů

Metoda první i druhé generace však vyžaduje použití DNázy k odstranění kontaminace DNA, což přináší určité nepříjemnosti pro následné následné experimenty.Reziduální DNáza sníží účinnost reverzní transkripce a sníží syntézu prvního vlákna cDNA, čímž ovlivní přesnost výsledků.

Proto je metoda extrakce třetí generace optimalizována na základě druhé generace.Experiment nepotřebuje přidávat žádné enzymy a RNA lze snadno získat pouze pomocí dvou sloupců.

Sloupec 1: Sloupec pro čištění DNA pro vyčištění DNA

Sloupec 2: Pouze RNA Sloupec specificky adsorbuje a obnovuje RNA

Taková jednoduchá operace nejen šetří čas, ale také usnadňuje provádění následných experimentů!

Reprezentativní produkty: QIAGEN RNeasy Plus aForegeneProdukty řady purifikace RNA

(RNeasy Plus)

(ForegenePlant Total RNA Isolation Kit）

Řekni ti to potichu!Foregene RNA kit také představuje super snadno použitelný RNase Eraser, který dokáže zcela odstranit 400μg RNázy na pevném povrchu za 1 minutu, aniž by do lidského těla přidával jakékoli toxické látky!

Obr1: Graf porovnání provozních procesů

Produkty Foregene dokážou dokončit extrakci RNA během pouhých dvou skladeb, nenechte ostatní žárlit na váš pokrok v experimentu!

Obr2:Eexperimentální výsledky srovnávací graf

První generace (1: TRIzol)

Druhá generace (2: RNeasy of QIAGEN)

Třetí generace (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Obr3: qPCR graf (graf křivky zesílení)

První generace (zelená znamená TRIzol -, červená znamená TRIzol +)

Druhá generace (nebesky modrá znamená QIAGEN RNeasy-, červená znamená QIAGEN RNeasy +)

Třetí generace (modrá znamená QIAGEN RNeasy plus, zelená znamená Foregene)

(Poznámka: qPCR graf „-“ znamená, že DNáza nebyla přidána a kontaminace DNA nebyla odstraněna. Proto je CT vyšší a výsledek není přesný; „+“ znamená, že byla přidána DNáza a kontaminace DNA byla odstraněna, výsledek je přesný)

Každý technický upgrade znamená, že provoz experimentu se vyvíjí jednodušším a uživatelsky přívětivějším směrem.

Foregene si klade za cíl pomoci většímu počtu vědeckých výzkumníků ušetřit čas a náklady na experimenty, získat vysoce kvalitní experimentální výsledky a společně vytvářet hodnotnější výsledky vědeckého výzkumu.